لاكتوز[7]
فرمول شیمیایی: C12H22O11.H2O
وزن ملکولی: 32/360
در درجه حرارت معمولی اتاق قابل نگهداري ميباشد.
قابل حل در آب میباشد.
مالتوز[8]
فرمول شیمیایی: C12H22O11.H2O
وزن ملکولی: 3/360
مالتوز دارای کمتر از 5/4 درصد گلوکز و کمتر از 5/5 درصد ماتوتریوز میباشد.
در درجه حرارت معمولی اتاق قابل نگهداري ميباشد.
قابل حل در آب میباشد.
دی- مانیتول[9]
فرمول شیمیایی: C6H14O6
وزن ملکولی: 2/182
بصورت کریستالهایی میباشد که کمتر از 1/1 درصد سوربیتول دارد.
در درجه حرارت معمولی اتاق قابل نگهداري ميباشد.
قابل حل در آب (20 درجه سانتیگراد/156 گرم در لیتر) میباشد.
رافینوز[10]
فرمول شیمیایی: C18H32O16.5H2O
وزن ملکولی: 5/594
رافینوز بهصورت کریستالهایی میباشد که کمتر از 1/0 درصد خاکستر سولفاته و کمتر از 001/0 درصد فلزات سنگین میباشد.
بهصورت خشک در درجه حرارت معمولی اتاق قابل نگهداري ميباشد.
قابل حل در آب (143 گرم در لیتر) میباشد.
دی- ریبوز[11]
فرمول شیمیایی: C5H10O6
وزن ملکولی: 1/150
دی- ریبوز ترکیبی است که دارای کمتر از 001/0 درصد فلزات سنگین نظیر سرب میباشد.
نشاسته برنج[12]
بهصورت خشک در درجه حرارت معمولی اتاق قابل نگهداري ميباشد.
ساكارز[13]
فرمول شیمیایی: C12H22O11
وزن ملکولی: 30/342
كيفيت اين ساكارز در مقايسه با ساكاروز استاندارد طوري است كه دوبار كريستاليزه شده است. تصفيه مضاعف تضمين ميكند كه عوامل رنگ دهنده طبيعي از چغندرقند حذف شده اند، بطوريكه يك قند سفيدِ بخصوص، حاصل شده است. مزيت ديگر آن اين است كه فرايند تصفيه مجدد هر گونه آلودگي آلي و غيرآلي باقيمانده را حذف ميكند. اين نتايج در يك قند شفاف سبب توليد يك سلول بي رنگ و شفاف خواهد شد. ساكاروز دوبار كريستاليزه شده Duchefa توسط آزمايشگاهها جهت كشت پروتوپلاست و تكثير درون شيشهاي بافتهای گياهي در آزمايشگاههاي كشت بافت بهكار مي رود.
کریستالهای بیرنگ خشک یا پودر کریستالی سفید کمتر از 0005/0 درصد باریم، کمتر از 00005/0 درصد سرب، کمتر از 0015/0 درصد سولفیت و کمتر از 02/0 درصد سولفات میباشد.
بهصورت خشک در درجه حرارت معمولی اتاق قابل نگهداري ميباشد.
قابل حل در آب میباشد.
4-4-6- مواد معدنی غذایی
بعد از قند ، مواد معدنی ، مهمترین گروه مواد غذایی در رشد این ویترو هستند. روشهای زیادی برای چگونگی ترکیب کردن نمکهای پر مصرف و کم مصرف وجود دارد که مهمترین آنها در جدول 1 داده شده است. چوست و همکارانش ( 1986) برنامه کامپیوتری را ابداع کردند که می توان با استفاده از آن ، مقادیر نمکهایی را که برای یک محیط کشت که خصوصیات اصلی آن ( متعلقات یونی، غلظت کامل یونی PH) شناخته شده است محاسبه کرد ؛ یا بر عکس می توان با داشتن ترکیبات مقادیر نمک سایر خصوصیات محیط کشت را به دست آورد. معمولا ازمحلول آلی غلیظ ذخیره [14] برای ساختن محیط کشت استفاده می شود . اگر چه امروزه محلولهای آماده نیز در دسترس می باشند. محلولهای ذخیره باید در حرارت اتاق و در تاریکی نگهداری شوند. در تهیه محلولهای ذخیره ممکن است اضافه کردن نمکها با هم سبب تشکیل رسوب شود که برای جلوگیری از این مشکل بایستی دستورالعملهای مربوط به ساخت محلولهای استاندارد را رعایت نمود در سالهای اخیر ، NA FE-EDTA( 38-25 میلی گرم در لیتر) به عنوان منبع آهن ، استفاده شده است.
انتخاب مخلوط نمکهای پر مصرف و کم مصرف ، شدیدا به گیاه مورد مطالعه بستگی دارد. کاربرد محیط کشت موراشی واسکوگ یا MS[15] به دلیل اینکه بسیاری از گیاهان به آن عکس العمل مناسبی نشان می دهند، بسیار متداول است. در هر حال باید توجه داشت که این محیط کشت الزاما همیشه برای رشد و نمو ایده آل نیست زیرا میزان نمک در آن خیلی بالاست. به عنوان مثال گیاهان جنس جربرا[16] و Rhododendronو kalmia ( نپل 1985) در کشت این ویترو، به نمک حساس هستند ( پیریک و سگرد 1973) برای گیاهان حساسی مثل بعضی از گونه های چوبی للود و مک کون ( 1980) محیط کشت WPM (محیط کشت مخصوص گیاهان چوبی)[17] را ارائه کرده اند.
درهنگام انتخاب مخلوط نمکهای پر مصرف و کم مصرف باید نکات ذیل را در نظر گرفت:
1- بعضی اوقات غلظت نهایی مهم است ( شکل 7-6) قسمت دوم جدول 1 غلظت یونها بر حسب میلی مول در لیتر می باشد. اعداد بوضوح نشان می دهند که محلول ناپ ( 1984) یک محیط کشت با نمک ضعیف و محیط کشت MS یک محیط کشت با نمک قوی است.
2- اگر چه بعضی اوقات از فرم آزت آلی استفاده می شود ( بخش 9-4-6) ولی معمول است که ازت حدود 12 تا 60 میلی مول در لیتر است. بیشتر گیاهان NO-3 را برابر NH+4 ترجیح می دهند، اگر چه در بعضی موارد عکس آن هم صادق می باشد. لازم است توازن صحیح را NH+ / NO-3
برای رشد و نمو ایده آل پیدا کرد.
3- اگر گیاه یونهای NH+4 را جذب کند ، PH کاهش یافته و ممکن است آگار به صورت مایع در آید و در نتیجه به علت جذب NH+4 به وسیله گیاه کاهش می یابد ، و جذب ازت در فرم NO-3 از حجیت پیدا می کند.
4- غلظت یونها بر حسب میلی مول در لیتر که در جدول 1 آمده بیانگر این است که نیاز K+ بین 2 تا 26 میلی مول در لیتر می باشد، در حالی که نیاز به H2po-4 ، Ca2+ ، Mg 2+ و SO42- کم است ( 1 تا 5 میلی مول درلیتر)