کتاب راهنمای آزمایشات فیزیولوژی گیاهی

عنوان

صفحه

فصل اول: مقرات ایمنی در آزمایشگاه

مقررات ایمنی جهت کار در آزمایشگاه­ها

2

تسهیلات آزمایشگاهی

2

مقررات سطح ایمنی برای کار با گیاهان آزمایشگاهی

2

مقررات ایمنی زیستی برای کار در آزمایشگاه

4

عملیات پیشگیری از آلودگی­های میکروبی

4

عملیات ویژه

5

رفع آلودگي

6

رفع آلودگي از روي ميز كار يا زمين

6

رفع آلودگي از روي بدن

6

حساسيت زاهاي تنفسي

7

نکات ایمنی در رابطه با نیتروژن مایع (LN2)

7

پرتو ماوراء بنفش

9

محافظت در برابر اشعه

9

نحوه كار با لامپ UV

9

موارد ايمني و كار با دستگاه مولد نور ماوراء بنفش UV

10

راه‌هاي حافظت در برابر آلودگي داخلي بدن

11

توصيه­هاي لازم جهت كار با مواد پرتو زا

11

مواد شیمیایی مورد استفاده در آزمایشگاه‌ها و سمیت ایجاد شده توسط آنها

12

مواد شيميايي

12

مواد شیمیایی سمی

13

كلروفرم

13

گوانيدين تيوسيانات

13

اكريل آميد

14

مركاپتواتانل

15

اتيديوم برومايد

15

فنل

16

روش­های ذخيره‌سازي مواد آزمایشگاهی

18

فصل دوم: آشنایی با وسایل آزمایشگاهی

1- بوته چيني (كروزه چيني)

22

2- شيشه ساعت

23

3- قيف شيشه‌اي

23

4- قیف جدا کننده

24

5- قطره چكان

25

6- بالن ژوژه یا بالن حجمی

26

7- استوانه مدرج

27

8- بشر

28

9- اسپاتول

29

10- بورت

29

11- بالن تقطیری

31

12- ارلن

32

13- قیف بوخنر

33

14-‌هاون چيني

34

15- دسيكاتور

35

16- جا لوله

36

17- پيپت

37

18- پوار اتوماتیک

38

19- پیپت دقیق یا سمپلر

39

20- ویال

44

21- پیپتور

44

فصل سوم: دستگاه‌های آزمایشگاه

آشنایی با انواع میکروسکوپ

48

انواع ميكروسكوپ

49

ميكروسكوپ نوری

49

ميكروسكوپ فلوئورسانس

50

ميكروسكوپ مركب

50

ميكروسكوپ استريو

51

ميكروسكوپ الكترونی

51

ميكروسكوپ الكترونی گذاره

52

ميكروسكوپ الكترونی نگاره

53

ميكروسكوپ اشعه ايكس

54

طريقه نگهداری از ميكروسكوپ

54

بررسی و نحوه کار میکروسکوپ نوری

54

اجزای میکروسکوپ نوری

55

توان تفکیک

56

کار با میکروسکوپ

57

آماده کردن نمونه میکروسکوپی

57

طرز نگه داشتن لام و لامل

57

هودهای آزمایشگاهی

59

هودهای میکروبی و کشت سلول

59

هودهای شیمیایی

61

هودهای بیولوژیک

61

دستگاه ترازو

62

ورتکس

65

صفحه گرم کننده (Hot plate)

65

بن ماری (حمام آب)

65

PH متر

66

میکروتوم

68

دستگاه کلونجر

70

دستگاه روتاري بخارکننده چرخان یا روتاری اواپراتور

72

دستگاه مایکروویو

75

دستگاه اتوکلاو

77

دستگاه آون

78

آون هيبريداسيون

79

دستگاه انکوباتورها

80

دستگاه اسپکتروفتومتر

82

مفسر

85

انواع دیگر اسپکتروفتومتر­ها

85

فلم فتومتری

90

دستگاه سوکسله

91

سانتريفوژ

92

نكاتي در رابطه با دستگاه اولتراسانتريفوژ

95

نكات ايمني كار با انواع سانتريفوژ

96

دستگاه  HPLC

101

انواع پمپ

107

فصل چهارم: واحدهای اندازه­گیری و روش‌های رقیق‌سازی

واحدهای سیستم متری

116

محلول­هائی که زیاد در آزمایشگاه مورد مصرف است

117

مولاریته چیست

118

رقیق نمودن

122

رابطه حجم و غلظت

123

فصل پنجم: معرف­های شیمیایی

1- تهیه آب آهک

126

2- تهیه محلول لوگل یا لگول

126

3- تهیه محلول ید

126

4- تهیه محلول تورنسل

126

5- تهیه محلول هلیانتین(متیل اورانژ)

126

6- تهیه محلول فنل فتالئین

126

7- تهیه محلول نیترات نقره

126

8- تهیه محلول گیمسا

126

9- تهیه محلول فوشین قلیایی

127

10- تهیه محلول کارمن زاجی

127

11- تهیه چسب نشاسته

127

12- تهیه آب ژاول

127

13- تهیه محلول سولفات مس

127

14- تهیه سولفات مس بدون آب

128

15- تهیه محلول سود 10 درصد

128

16- تهیه محلول پتاس 5 درصد

128

17- تهیه اسیدکلریدریک 5/0 نرمال

128

18- تهیه اسیدکلریدریک 1 نرمال

128

19- تهیه محلول بیکربنات پتاسیم

128

20- تهیه آبی تولوئیدین

128

21- تهیه استو کارمن

128

22- تهیه برم تیمول بلو

128

23- تهیه بلودومتیل

129

24- تهیه سبز ید

129

25- تهیه محلول گلوکز 1 درصد

129

26- تهیه کشت مخمر

129

27- تهیه کشت پارامس

129

28- تهیه محلول پپسین

129

29- تهیه معرف بیوره

129

30- تهیه محلول قرمز کنگو

129

31- تهیه قرمز خنثی

129

32- تهیه محلول فیکساتور

130

33- تهیه محلول سبز متیل

130

34- تهیه محلول بندکیت کیفی

130

35- تهیه فهلینک A

130

36- تهیه فهلینگ B

130

37- تهیه محلول بیسمارک

130

38- تهیه اسیدکلریدریک رقيق

130

39- تهیه محلول جهت شمارش گلبول‌های قرمز

131

40- محلول 30% کلرور کبالت

131

41- تهیه سود رقیق

131

42- تهیه معرف تالن (محلول نیترات نقره آمونیاکی)

131

43- تهیه معرف شیف

131

44- تهیه محلول لوکاس

131

فصل ششم: رنگ­آمیزی بافت­ها

تهیه نمونه­های گیاهی برای بررسي بافت شناسی

134

تهيه نمونه­هاي گياهي از ساقه وريشه گياهان تک لپه و دو لپه

135

رنگ آميزي ساده بافت­هاي گياهي

135

رنگ‌آميزي مضاعف بافت­هاي گياهي

135

فصل  هفتم: روش­های استریل

استریل کردن و ضدعفونی

138

روش­های رایج سترون کردن

138

خشك شدن لوازم استريل

138

روش­های فیریکی استریل‌کردن

139

ضدعفونی بذرها

140

ضدعفونی داخلی بذرها

140

فصل هشتم: اندازه­گیری خصوصیات فیزیکی

اندازه­گیری طول، عرض و ضخامت

142

اندازه­گیری میانگین قطر هندسی

142

اندازه­گیری حجم

143

اندازه­گیری حجم

143

اندازه­گیری کرویت

143

اندازه­گیری سطح

144

جرم، حجم و جرم حجمي

144

اندازه­گیری وزن تر میوه

145

فصل نهم: اندازه­گیری رنگدانه­های گیاهی

اندازه‌گيري کلروفيل

148

اندازه‌گيري کارتنوئید

149

اندازه­گیری کاروتنوئيد

150

اندازه­گیری کلروفیل و کارتنوئید با روش آرنون

151

اندازه­گیری محتوای کلروفیل و کاروتنوئید کل

152

اندازه­گيري آنتوسيانين

153

اندازه­گیری آنتوسیانین

154

اندازه‌گیری لیکوپن

156

فصل دهم: اندازه­گیری خصوصیات فیزیکی و بیوشیمیایی گیاهان

اندازه­گیری رطوبت

160

اندازه­گیری خاکستر

160

اندازه­گیری سفتي گوشت ميوه

161

اندازه­گیری درصد آب میوه

161

هدایت الکتریکی (EC) آب میوه

161

اندازه­گیری درجه اسیدی (pH) آب­میوه

162

اندازه­گیری مواد جامد محلول آب ­میوه

163

اندازه­گیری فیبر خام

164

اسیدیته قابل تیتراسیون

165

اسيديته قابل تيتراسيون در انار

166

اندازه­گیری اسید تارتاریک در انگور

167

اندازه­گیری شاخص طعم میوه

167

اندازه­گیری ويتامين ث در انار

168

اندازه­گیری ویتامین ث آب میوه به روش تیتراسیون

170

اندازه­گیری ویتامین C با کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا

171

اندازه­گیری ویتامین E

173

اندازه­گیری چربی

175

اندازه­گیری پروتئین

176

تعیین نوع و درصد اسیدهای چرب

177

استخراج چربی و متیله­کردن اسیدهای چرب

177

استخراج قند محلول کل با روش آنترون

178

استخراج قند محلول کل با روش فنل-اسیدسولفوریک

179

اندازه‌گیری قندهای احیایی (گلوکز)

182

اندازه‌گیری قندهای احیا به روش دی نیترو سالیسیلیک اسید

182

اندازه‌گیری قندهای غیر احیا (ساکارز)

184

اندازه‌گیری نشاسته

185

استخراج و اندازه‌گیری قندهای محلول (قند کل، ساکارز، گلوگز و فروکتوز)

186

استخراج قندهاي محلول

187

اندازه‌گيري قند كل

187

اندازه‌گيري قندهاي احيايي

189

اندازه‌گيري قندهاي غيراحيايي

190

اندازه‌گيري فروكتوز

192

استخراج و اندازه‌گيري نشاسته

193

اندازه­گیری پکتین

194

اندازه‌گیری میزان پرولین

196

اندازه­گیری تانن

197

اندازه­گیری محتوای نسبی آب برگ

197

اندازه­گیری نشت الکترولیت

198

اندازه­گيري كلر (كلر سنجي)

198

اندازه­گیری روغن در گیاهان

200

روش سوکسله

200

روش سانتریفیوژ

200

اندازه­گیری ارزش پراکسید روغن

201

اندازه­گیری ضریب شکست

201

اندازه‌گیری اسید چرب آزاد

202

تعیین مقدار کلروفیل و کارتنوئید روغن

202

اندازه­گیری ضریب خاموشی

203

فصل یازدهم: روش‌های اندازه­گیری متابولیت­های ثانویه

استخراج فنل و فلاونوئیدها

206

اندازه­گیری ترکیبات فنولی کل

206

اندازه‌گيري محتواي فلاونوئيد

207

اندازه‌گیری فعالیت آنتی‌اکسیدانی توسط به دام اندازی رادیکال (DPPH)

208

تهیه عصاره متانولی برای اندازه­گیری فعالیت آنتی­اکسیدانی، تعیین فنل و فلاونوئید کل عصاره خام گیاه

209

اندازه­گیری فنل کل

209

اندازه­گیری فلاونوئید کل

211

ارزیابی فعالیت آنتی­اکسیدانی عصاره­های گیاهی از قدرت کاهندگی

214

اندازه­گیری فعالیت آنتی­اکسیدانی با استفاده از معرف DPPH

216

اندازه­گیری فعالیت آنتی­اکسیدانی با استفاده از معرف بتاکاروتن- لینولئیک­اسید

217

اندازه­گیری محتوای لوتئولین و کوئرستین در عصاره­های گیاهی

218

اندازه­گیری اثر مهاری عصاره­ گیاهی بر فعالیت آنزیم زانتین اکسیداز

210

اندازه‌گیری اسید کلروجنیک و اسید کافئیک با استفاده از دستگاه HPLC

221

تهیه نمودار کالیبراسیون برای اسید کلروجنیک و اسید کافئیک

222

تزریق نمونه گیاهی

223

اندازه­گیری الئوروپین با استفاده از دستگاه HPLC

224

تزریق نمونه­ها

226

اندازه‌گیری روتین

227

اندازه­گيري فرولیک اسيد و پی­کوماریک اسيد با استفاده از دستگاه HPLC

228

اندازه­گیری عدد پراکسید

231

اندازه­گیری عدد تیو­باربیتوریک اسید

232

اسانس‌های گیاهی

232

تفاوت اسانس‌ها با روغن‌های غیرفرار

233

شیمی اسانس­ها

234

هيدروکربن‌‌ها

234

الکل‌ها

234

آلدئيدها

235

فنل­ها

235

تقسیم بندی اسانس‌ها بر اساس ساختار شیمیایی

236

فنیل پروپن‌ها

237

فعالیت زیستی اسانس­ها

237

خاصیت ضداکسایشی اسانس­ها

238

فعالیت ضد باکتریایی اسانس‌ها

238

فعاليت ضد قارچي اسانس‌ها

239

استخراج و اندازه­گيري اسانس

240

جمع‌آوری گياه و استخراج اسانس گلبرگ­ها (عصاره مطلق و کانکريت)

242

شناسايي ترکيب­های تشکيل‌دهنده

242

مشخصات دستگاه‌های مورد استفاده

242

فصل دوازدهم: اندازه­گیری فعالیت آنزیم­های گیاهی

سنجش فعالیت برخی آنزیم­ها

246

آنزیم­های آلفا و بتا آمیلاز

246

سنجش فعالیت آلفا آمیلاز

247

سنجش فعالیت بتا آمیلاز

247

سنجش فعالیت آنزیم اینورتاز

248

سنجش فعاليت آنزيم پراكسيداز

249

سنجش فعاليت آنزيم كاتالاز

250

سنجش آنزیم پلی فنل اکسیداز

251

روش تهیه عصاره آنزیمی برگ

252

تعیین میزان فعالیت آنزیم کاتالاز

252

تعیین میزان فعالیت آنزیم آسکوربات پراکسیداز

253

اندازه‌گيري گليسين بتائين (GB)

253

فصل  سیزدهم: اندازه­گیری برخی از شاخص­های مورفولوژیکی و بیوشیمیایی رشدی گیاهان

تعیین درصد میزان کلونیزاسیون قارچ­ها در ریشه

256

اندازه­گیری درجه تغییر، رنگ میوه و سوختگی برگ ناشی از تنش­ها در گیاهان

256

بررسی گیاهان بر مقاومت به بيماری سفيدک پودری

256

محاسبه شاخص‏های رشد گیاهان

257

فتوسنتز

257

اندازه­گیری رنگ

265

تنفس سنج نوع سرنگی

266

بررسی­های مربوط به گرده­افشانی در گیاهان و مسائل مربوط به گامت­های نر و ماده و سیتولوژی

267

اندازه‌گيری زنده مانی دانه گرده

267

بررسی تأثير ساکاروز و اسيد بوريک برميزان جوانه زنی دانه گرده

267

بهينه‌سازی کشت ميکروسپور رز

268

محيط‌های شستشو

269

بررسی سیتولوژی گیاهان

272

رنگ‌آميزی هسته توسط DAPI

272

رنگ‌آميزی با DAPI

272

مطالعه گرده­افشانی و محاسبه شاخص خودناسازگاری

273

جمع­آوری دانه­های گرده

274

مطالعه درصد دانه­های گرده­ی زنده با روش رنگ­آمیزی

274

جوانه‌دار کردن بذور و تهیه ریشه

275

نمونه‌برداری از کالوس­های حاصل از کشت بافت

275

آزمایش­های سیتوژنتیک

275

پیش تیمار با محلول هیدروکسی کینولین

276

پیش تیمار با محلول α- برومونفتالین

276

پیش تیمار با آب سرد

276

تهیه محلول کارنوی

277

رنگ‌آمیزی

278

تهیه رنگ استوکارمن

279

تهیه رنگ اورسئین استیک

280

اسکواش

280

نگهداری اسلاید

280

بررسی میکروسکوپی

280

شمارش تعداد کروموزوم‌ها و عکس‌برداری

281

کشت باکتری‌های، آلوده‌کننده و یا همزیست با گیاهان و روش­های متداول آن

281

تعریف محیط کشت

281

انواع محیط کشت

281

محیط‌های کشت انتخابی

282

محیط‌های افتراقی

282

محیط­های غنی­کننده

283

محیط کشت کامل

283

آگار چیست

283

انواع کشت باکتری

284

روش کشت باکتری در محیط کشت مایع

284

روش کشت باکتری در محیط جامد

285

روش کشت عمقی در لوله

285

روش کشت در سطح شیبدار در لوله

285

روش تهیه محیط­های کشت

286

روش تهیه محیط پیش ریخته

286

روش کشت خطی

287

کشت سطحی

287

کشت آمیخته یا پورپلیت

287

فصل چهاردهم: اندازه­گیری DNA و RNA

آماده­سازی نمونه برای استخراج دی­ان­ای

290

استخراج دی­ان­ای

290

تعيين كميت و كيفيت دی­ان­ای استخراج شده

292

استخراج RNA

294

تعيين كميت و كيفيت RNA

295

فصل  پانزدهم: اندازه­گیری برخی عناصر معدنی و آلی در  بافت­های گیاهی

روش تهیه­ عصاره­ بافت گیاهی جهت اندازه­گیری عناصر

298

اندازه­گیری پتاسیم در بافت­های گیاهی

298

اندازه­گیری فسفر در بافت­های گیاهی به روش اولسن

298

اندازه­گیری کلسیم و منیزیم در عصاره­ی بافت گیاهی

299

اندازه­گیری ازت کل در بافت­های گیاهی با روش کجلدال

299

اندازه­گیری عناصر کم مصرف

300

فصل  شانزدهم: اندازه­گیری برخی از شاخص­های مربوط به بذر

آزمون­های مربوط به بذور

302

مشخص نمودن درصد خلوص بذر

302

آزمون قوه نامیه بذر (قدرت جوانه­زدن)

302

ارزش حقیقی بذر

303

آزمون سرعت جوانه‌زنی بذرهای

303

ضریب سرعت جوانه زنی

304

ارزش جوانه‌زنی بذر

304

آزمون تترازولیوم

305

منابع

307